Фенілгалактозид CAS:2818-58-8

Вплив на активність ферментів: Фенілгалактозид зазвичай використовується для вимірювання активності ферменту β-галактозидази. Коли фенілгалактозид гідролізується β-галактозидазою, він вивільняє п-нітрофенол. Накопичення п-нітрофенолу можна кількісно виміряти, що дає уявлення про активність β-галактозидази. Цей ефект використовується в таких застосуваннях, як ферментні аналізи та системи скринінгу.

Аналіз експресії генів: Фенілгалактозид часто використовується як субстрат у молекулярно-біологічних експериментах для вивчення експресії генів. Ген lacZ, який кодує β-галактозидазу, зазвичай зливається з регуляторними послідовностями інших генів, що цікавлять. Експресія гена lacZ та гідроліз фенілгалактозиду β-галактозидазою можуть вказувати на характер експресії та рівень досліджуваного цільового гена.

Системи скринінгу: Фенілгалактозид є важливим компонентом систем скринінгу, що використовують активність β-галактозидази. Одним із широко відомих прикладів є метод синьо-білого скринінгу, який використовується для ідентифікації рекомбінантних або трансформованих клітин в експериментах з молекулярної біології. Колонії, які успішно поглинули рекомбінантну ДНК або пройшли генетичну рекомбінацію, експресуватимуть β-галактозидазу, що призведе до гідролізу фенілгалактозиду та утворення синього кольору.

Очищення білка: У деяких випадках фенілгалактозид може бути використаний як ліганд для афінної хроматографії для очищення білків, які специфічно зв'язуються з β-галактозидазою або активуються нею. Білок, що нас цікавить, може мати афінну мітку або мітку злиття, що містить домен зв'язування β-галактозидази. Пропускаючи суміш білків через колонку з іммобілізованим фенілгалактозидом, бажаний білок можна вибірково затримати та згодом елюювати.