Фенілгалактозид CAS: 2818-58-8

Вплив на активність ферменту: фенілгалактозид зазвичай використовується для вимірювання активності ферменту β-галактозидази.Коли фенілгалактозид гідролізується β-галактозидазою, він вивільняє п-нітрофенол.Накопичення п-нітрофенолу можна кількісно виміряти, що дає змогу зрозуміти активність β-галактозидази.Цей ефект використовується в таких програмах, як ферментні аналізи та системи скринінгу.

Аналіз експресії генів: фенілгалактозид часто використовується як субстрат в експериментах молекулярної біології для вивчення експресії генів.Ген lacZ, який кодує β-галактозидазу, зазвичай злитий з регуляторними послідовностями інших цікавих генів.Експресія гена lacZ і гідроліз фенілгалактозиду β-галактозидазою можуть вказувати на структуру експресії та рівень досліджуваного цільового гена.

Системи скринінгу: фенілгалактозид є важливим компонентом систем скринінгу, які використовують активність β-галактозидази.Одним із широко відомих прикладів є синьо-білий метод скринінгу, який використовується для ідентифікації рекомбінантних або трансформованих клітин в експериментах молекулярної біології.Колонії, які успішно поглинули рекомбінантну ДНК або пройшли генетичну рекомбінацію, експресуватимуть β-галактозидазу, що призведе до гідролізу фенілгалактозиду та утворення синього кольору.

Очищення білків: у деяких випадках фенілгалактозид можна використовувати як ліганд для афінної хроматографії для очищення білків, які специфічно зв’язуються з β-галактозидазою або активуються нею.Білок, що представляє інтерес, може мати афінну мітку або мітку злиття, що містить домен зв’язування β-галактозидази.Пропускаючи білкову суміш через колонку з іммобілізованим фенілгалактозидом, потрібний білок можна вибірково утримувати та згодом елюювати.